操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。

商品屬性：

商品介紹：

測定意義

α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解，主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發(fā)至關重要，種子萌發(fā)初期，其催化產生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉化和消耗，為種子的萌發(fā)提供最初的能量來源，后期則主要參與細胞壁儲藏多糖水解。

測定原理：

α-GAL分解對-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基，后者在400nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算α-GAL活性。

自備用品：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵 97%2-氟-5-羥基吡 95%Anti-CKMT2/FITC  熒光素標記肌酸激2抗體IgG

2-溴-3-辛基噻吩 97%3-氟-5-羥基吡 97%Anti-CKIP-1/FITC  熒光素標記酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體IgG

3-溴噻吩 97%3-氟-2-羥基吡 97%Anti-CKLFSF2(human)/FITC  熒光素標記人類新因子/趨化素樣因子超家族成員2抗體IgG

2-溴-3-甲基噻吩 99%2-氟-3-(三氟甲基)苯甲酸 98%Anti-CLCA4/FITC  熒光素標記鈣激活氯離子通道4抗體IgG

1,4-雙(二苯膦基)丁烷 96%2-氟-3-羥基吡 97%Anti-CLDN1/FITC  熒光素標記緊密連接蛋白1抗體(C端)IgG

雙(三苯基膦)氯化鎳(Ⅱ) 98%4-氟苯肼鹽酸鹽 97%Anti-CLDN1/FITC  熒光素標記緊密連接蛋白1抗體IgG

[1,3-雙（二苯膦基）烷]二氯化鈀 Pd 18%4-羧基苯肼鹽酸鹽 98%Anti-ocludin-5/FITC  熒光素標記緊密連接蛋白-5抗體IgG

2-溴芴 97%2-肼基苯甲酸鹽酸鹽 98%Anti-CLDN3/Claudin 3/FITC  熒光素標記緊密連接蛋白3抗體IgG

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